PCR實驗室 醫學實驗室建設

PCR聚合酶鏈反應，是一項在短時間內體外大量擴增特定的DNA片段的分子生物學技術 ,  它可看作是生物體外的特殊DNA復制。進行聚合酶鏈反應的實驗室場所，為PCR擴增實驗室。

PCR實驗室或稱為PCR擴增實驗室，就是進行聚合酶鏈反應的實驗室場所 ,  廣泛應用于生物學各個領域 。例如艾滋病、乙型肝炎、禽疫病、癌基因的檢測和診斷、DNA指紋、個體識別、親子鑒定及法醫物證、動植物檢疫、動物及其衍生產品檢測、動物飼料、化妝品、食品檢測、轉基因作物與轉基因微生物檢測等。

PCR實驗室主要由四間相鄰的實驗室組成，包括試劑準備區 、標本制備區、基因擴增區和產物分析區。其四區的工作內容如下：

PART.1

試劑準備區

該區域主要完成試劑和主反應混合液的儲存、配制和封裝工作。所有運送到該區域的試劑和材料不應經過其他區域 ,  試劑和原材料應在本區內儲存和制備。本區域的氣壓應相對外界保持正壓。

由于該區域有多種試劑，所以 “安全” 應是平面設計首要考慮因素。平面設計時應保持通風流暢、逃生暢通。首先實驗臺布置在房間的兩側，中間的過道全部通向走廊，便于疏散。同時根據國際人體工程學的標準，實驗臺與實驗臺通道設計為1500mm，中間的通道可滿足兩邊坐人中間過人的要求 。

PART.2

標本制備區

該區域的功能是樣本的保存、核酸提取和貯存 、樣本加入擴增反應管和測定DNA 的合成。樣本應直接運送至該區并儲存在本區內，不得經過其他區域。

對于氣流壓力的控制。由于在本區內加樣操作可能產生氣溶膠，為避免氣溶膠擴散出去對外界造成污染 ,  本區應對外界保持負壓。從質量控制的角度而言，本區相對于擴增反應混合物配制和基因擴增區以及擴增產物分析區為正壓，以避免從鄰近區進入本區的氣溶膠污染 。

但當涉及病原微生物時，從生物安全的角度看，樣本制備區應符合GB19489-2008《實驗室生物安全通用安全》對BSL-2實驗室的各項安全要求 ,  此時要求本區相對于擴增區為負壓 ,  故涉及病原微生物操作時，在綜合考慮質量控制 、生物安全因素的前提下，整體上標本制備區與擴增區的壓力應持平， 即均為負壓 ,  兩個相鄰房間之間的負壓值基本相當 。

PART.3

基因擴增區

該區域的功能是DNA擴增和擴增片段的測定。此外 ,  反應混合液  (來自試劑貯存和制備區)  制備成反應混合液和已制備的DNA模板  (來自標本制備區)  的加入等也可在本區內進行。對于氣流壓力的控制 ,  相對于鄰近區域為負壓，以避免氣溶膠從本區漏出。為避免氣溶膠所致的污染，應盡量減少在本區內不必要的走動。個別操作如加樣等應在超凈臺內進行。

PART.4

 產物分析區

該區域的功能是擴增產物的分析。該區域可能會用到某些可致使基因突變的有毒物質，應特別注意實驗人員的安全防護。對于氣流壓力的控制 ,  該區域是PCR實驗的最后一步 ,  壓力應為最低 ,  相對于鄰近區域為負壓，以避免氣溶膠從本區漏出。為避免氣溶膠所致的污染，應盡量減少在本區內不必要的走動。

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